MB22木聚糖酶发酵条件的研究
2007-04-13 11:56:50   来源：本站原创   评论：0 点击：

    从图2可以看出，在添加氮源的培养基中，MB22菌发酵产木聚糖酶的活性显著高于不添加氮源时的对照培养基；而不同氮源对MB22菌产酶活性的影响分别是：添加无机氮源(NH4)2SO4时MB22菌产酶活性最高，添加NH4NO3次之，添加有机氮源蛋白胨时MB22菌产酶活性最低。
2.1.3 起始pH值的选择
    在上述碳源和氮源基础上，分别以pH4.0，pH5.0，pH6.0，pH7.0作为发酵培养基灭菌前起始pH进行MB22菌发酵产酶试验，其结果如图3所示。

    图3表明：培养基的起始pH对MB22菌发酵产酶活性的影响较为明显，起始pH5.0为最佳起始pH，MB22菌产酶活性最高；而起始pH4.0时，MB22菌发酵产酶活性最低。
2.2 正交试验
2.2.1 因素水平
    根据试验条件，采用L9（34）的正交试验，不考虑因素间的相互作用，试验因素和水平的选择如表1所示。

2.2.2 正交试验结果与分析
    正交试验结果如表2所示。

    从表2可以看出：A2B2C2D3为本试验的最优水平组合，即碳源∶氮源=10∶1,CaCO3添加量为1.5g/l，Tween80添加量为2.0g/l，MgSO4·7H2O添加量为1.5g/l。
由极差分析比较即RA>RD>RB>RC可以看出：因素对MB22菌产木聚糖酶活的影响主次顺序是ADBC。即碳氮比例对MB22菌产酶活性的影响最大，其次是MgSO4·7H2O添加量、CaCO3添加量，而Tween80添加量对MB22菌产酶活性的影响最小。
2.3 验证试验
    结合单因素试验和正交试验结果，在最优发酵培养基配比下，即培养基配比为(g/l)：麸皮＋玉米芯为(3/7)40；(NH4)2SO4为4；CaCO3为1.5；Tween80为2.0；MgSO4·7H2O为1.5；起始pH为5.0，摇床培养温度为30℃，转速为160r/min，对MB22菌进行发酵培养4d，测定其产酶活性，验证培养基优化效果。一共做了9次验证试验，其中4号试验结果与正交试验结果基本吻合，MB22菌发酵产酶能力最强，木聚糖酶活力最高达887.62U/ml。该试验验证了最佳组合的优势效应。
2.4 发酵时间对产酶的影响
    以优化培养基在优化条件下发酵培养MB22菌，在不同发酵时间测定其产木聚糖酶酶活，得到产酶活性随发酵时间的变化曲线如图4所示。