MB22木聚糖酶发酵条件的研究
2007-04-13 11:56:50   来源：本站原创   评论：0 点击：

1 材料和方法
1.1 菌种
    芽胞杆菌MB22菌株：从生物工程实验室保藏菌种中筛选得到。
1.2 原料
    玉米芯：采自义马市郊。
    麸皮：采自义马市郊。
1.3 培养基
    种子培养基（g/l）：玉米芯+麸皮（7/3）40，(NH4)2SO42.5，CaCO31.5，NaCl1.5，Tween80 2.5，MgSO4·7H2O1.0。
    发酵基础培养基：碳源采用麸皮、玉米芯粉；氮源用(NH4)2SO4，NH4NO3，蛋白胨；其它有CaCl2，NaCl，Tween80，MgSO4·7H2O，通过试验确定最优组合。
1.4 培养方法
    种子培养条件：30℃，160r/min，装料量50ml，250ml三角瓶振荡培养3d。
发酵培养条件：30℃，160r/min，接种量约为4%，装料量50ml，250ml三角瓶振荡培养4d。
1.5 木聚糖酶活测定方法
    因素轮换法试验中酶活测定采用标准对照法，正交试验以及发酵时间试验中酶活测定采用工作曲线法[6]。
2 结果与讨论
2.1 因素轮换试验
    微生物发酵生产木聚糖酶的影响因素很多，碳源及氮源等营养物是影响木聚糖酶酶活的重要因素。
2.1.1 碳源的选择
    分别用麸皮、玉米芯粉和麸皮（30%）+玉米芯粉（70%）作为碳源，在培养基中添加量均为40g/l，进行发酵产酶试验。MB22菌利用不同碳源发酵产酶的结果如图1所示。

    由图1可以看出：以麸皮为单一碳源时，MB22菌的产酶能力高于以玉米芯粉为单一碳源的产酶能力。而单一碳源与复合碳源相比，玉米芯粉+麸皮为复合碳源的产酶活性又显著高于单一碳源。分析原因，可能是麸皮中提供了较多的生长因子有利于MB22菌的生长，而玉米芯中木聚糖的存在形式更有利于诱导木聚糖酶的产生。
2.1.2 氮源的选择
    以玉米芯粉(70%)+麸皮(30%)为复合碳源，添加量为40g/l，分别以(NH4)2SO4、NH4NO3、蛋白胨为氮源，添加量均为4.0g/l，并以不添加氮源的培养基作对照，进行发酵产酶试验，其结果如图2所示。