氢化可的松发酵液3次提取产物含量的研究
2007-10-08 21:33:09   来源：药　物　生　物　技　术   评论：0 点击：

　　氢化可的松的生产主要是通过生物合成的方法实现的。由于反应是在一个混合酶系中进行的,生物合成过程中产生的杂质较多,因此对氢化可的松成品质量影响较大。为此对发酵液分步提取所得的产物,分别进行了含量分析研究。针对不同提取成分及其含量采用不同的分离纯化处理,可对杂质分离工序有较强的指导意义,有利于提高氢化可的松成品的质量和收率。
1　材料与方法
1·1　材料
1·1·1　氢化可的松发酵液　由本厂发酵车间提供
1·1·2　仪器与试药　Alltech HPLC色谱仪,UV检测器,色谱柱:C18,5μ,4·6 mm×250 mm,醋酸丁酯,四氢呋喃,纯化水
1·2　实验方法
1·1·1　提取方法　取发酵液200 ml置于分液漏斗中,加醋酸丁酯200 ml,振摇10 min,静置20min,取上层溶液进行浓缩蒸干,得到第一次提取样品。下层溶液同法分别进行2次、3次提取。对每次得到的样品分别进行色谱分析。
1·1·2　产物分析方法　高效液相色谱法[1]参照相关物质项进行检测。
流动相配比:四氢呋喃-水=(230?770);检测波长:254 nm;流速:1·0 ml/min;检测溶液:取供试样品25·0 mg,用四氢呋喃2 ml溶解,加水稀释至10·0 ml。
2　试验结果
氢化可的松发酵液3次提取产物含量分析结果见表1;新工艺研究结果见表2。
3　讨　论
(1)通过表1数据分析比较发现,随着提取次
数的增加,提取物主要成分中各成分的相对含量发生了很大的变化。目标产物氢化可的松的含量逐渐降低,其他各杂质成分的含量逐渐增加。提取物中除目标产物和主要杂质成分外,随着提取次数的增加,其他杂质总含量也是增加的。第三次提取所得混合物中表氢化可的松(Isohydrocortisone)的含量增加到35·27%,超过了目标产物氢化可的松的含量23·49%,这是符合逻辑的。