乳酸菌饮料中乳酸菌的微生物学检验
2007-03-13 19:12:50 来源:本站原创 评论:0 点击:
乳酸菌饮料中乳酸菌的微生物学检验
GB/T 16347—1996
1 主题内容与适用范围
本标准规定了乳酸菌饮料中乳酸菌检验的技术要求。
本标准适用于以鲜乳、乳粉或辅以大豆等为原料,经乳酸菌发酵加工制成的具有相应风味的活性乳酸菌饮料。
2 引用标准
GB 4789.28 食品卫生微生物学检验 染色法、培养基和试剂
3 术语
乳酸菌:一群能分解葡萄糖或乳糖产生乳酸,需氧和兼性厌氧,多数无动力,过氧化氢酶阴性,革兰氏阳性的无芽胞杆菌和球菌。
乳酸菌菌落总数:检样在一定条件下培养后,所得1mL检样中所含乳酸菌菌落的总数。
4 设备和材料
4.1 温箱:36±
4.2 冰箱:0~
4.3 恒温水浴:46±
4.4 电炉:可调式。
4.5 吸管:容量为1,10和25mL。
4.6 广口瓶或三角瓶:容量为500mL。
4.7 平皿:直径为
4.8 试管:18×
4.9 显微镜。
5 培养基和试剂
5.1 改良TJA培养基(改良番茄汁琼脂培养基)。
5.2 改良MC培养基(Modified Chalmers培养基)。
5.3 0.1%美兰牛乳培养基。
5.4 6.5%氯化钠肉汤。
5.5 pH9.6葡萄糖肉汤。
5.6 40%胆汁肉汤。
5.7 淀粉水解培养基。
5.8 精氨酸水解培养基。
5.9 乳酸杆菌糖发酵管。
5.10 七叶苷培养基。
5.11 革兰氏染色液:按GB 4789.28规定执行。
5.12 3%过氧化氢溶液:按GB 4789.28规定执行。
5.13 蛋白胨水、靛基质试剂:按GB 4789.28规定执行。
5.14 明胶培养基:按GB 4789.28规定执行。
5.15 硝酸盐培养基、硝酸盐试剂:按GB
4789.28规定执行。
5.16 生理盐水:定量分装于三角瓶和试剂管内灭菌。
6 乳酸菌菌落总数的测定
6.1 检验程序
乳酸菌菌落总数检验程序如下:
(略)
6.2 操作步骤
<IMG height="22" alt="J343200351.jpg (4588 字节)" src="30-1.jpg" width="124">
6.3 乳酸菌在改良TJA和改良MC培养基上菌落生长形态特征见表1。
表1 乳酸菌在不同培养基上菌落特征
(表略)
7 乳酸菌的鉴定
对上述分离到的乳酸菌需进行菌种鉴定时,则作以下试验。
7.1 菌种制备:自平板上挑取菌落,接种于改良TJA或改良MC琼脂斜面,于36±
7.2 乳酸杆菌鉴定试验:极少见还原硝酸盐,不液化明胶,不产生靛基质和硫化氢。
7.3 常见乳杆菌属内种的碳水化合物反应,见表2。
7.4 产乳酸的链球菌的鉴别试验,见表3。
表2 常见乳杆菌属内种的碳水化合物反应
(表略)
表3 乳酸的链球菌的鉴别表
(表略)
附录A
数种专用培养基及试剂
(补充件)
A1 改良TJA培养基(改良番茄汁琼脂培养基)
A1.1 成分
番茄汁 50mL
酵母抽提液
肉膏
乳糖
葡萄糖
K<SUB>2</SUB>HPO<SUB>4</SUB>
吐温80
乙酸钠
琼脂
水加至.1000mL pH6.8±0.2
A1.2 制法
番茄汁的制作:将新鲜番茄洗净,切碎(切勿捣碎),放入三角烧瓶,置
制法:将所有成分加入蒸馏水中,加热溶解,校正pH6.8±0.2。分装烧瓶,高压灭菌
15~20min。临用时加热熔化琼脂,冷至
A2 改良MC培养基
A2.1 成分
大豆蛋白胨
牛肉浸膏
酵母浸膏
葡萄糖
乳糖
碳酸钙
琼脂
蒸馏水 1000mL
1%中性红溶液 5mL
硫酸多粘菌素B(酌情而加)10万国际单位
A2.2 制法
将前面7种成分加入蒸馏水中,加热溶解,校正pH6,加入中性红溶液。分装烧瓶,高压灭菌
A3 0.1%美兰牛乳培养基
新鲜脱脂牛乳 90mL
1%美兰水溶液 10mL
A4 6.5%氯化钠肉汤
肉浸液(PH7.6) 100mL
氯化钠
A5 pH9.6葡萄糖肉汤
普通肉汤校正pH9.6加入0.2%葡萄糖。
A6 40%胆汁肉汤
pH7.6肉浸液 60mL
葡萄糖
牛胆汁 40mL
A7 淀粉水解培养基
PH7.6肉浸液琼脂 90mL
羊血清 5mL
3%淀粉溶液 10mL
A7.1 将肉浸液琼脂溶化。
A7.2 待冷至
A8 精氨酸水解培养基
蛋白胨
氯化钠
磷酸氢二钾
L精氨酸
1.6%溴甲酚紫酒精溶液 1.4mL
琼脂
蒸馏水 100mL
pH7.2
A9 乳酸杆菌糖发酵管
A9.1 基础成分
牛肉膏
蛋白胨
酵母浸膏
吐温80 0.5mL
琼脂
1.6%澳甲酚紫酒精溶液 1.4mL
蒸馏水 1000mL
A9.2 按0.5%加入所需糖类,并分装小试管。
A10 七叶苷培养基
蛋白胨
磷酸氢二钾
七叶苷
枸橼酸铁
1.6%溴甲酚紫酒精溶液 1.4mL
蒸馏水 100mL
附加说明:
本标准由卫生部卫生监督司提出。
本标准由南京市卫生防疫站、广东省食品卫生监督检验所、上海市食品卫生监督检验所负责起草。
本标准主要起草人陈晓蔚、刘敏、杨明、宋曼丹、瞿明娟、周蓓君。
本标准由卫生部委托技术归口单位卫生部食品卫生监督检验所负责解释。
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