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阿卡波糖发酵工艺的研究
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更新时间: 2012-02-07 16:53:34
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阿卡波糖发酵工艺的研究

阿卡波糖发酵工艺的研究
魏淑梅  洪军
【摘要】目的:探索阿卡波糖的发酵工艺,以提高阿卡波糖的发酵水平。方法:对阿卡波糖发酵培养基的考察,确定了阿卡波糖生物合成最佳的复
合氮源比例,同时考察了发酵培养基中速效碳源、速效氮源、磷酸盐对阿卡波糖生物合成的影响,确定了其抑制作用浓度和最适作用浓度。结果:确
定了最佳复合氮源比例组合为热榨黄豆饼粉/冷榨黄豆饼粉为1/2混合,得出葡萄糖最适浓度为2.5% ,铵离子浓度为0.1% ,磷酸盐浓度为0.2% 。
【关键词】阿卡波糖;发酵工艺;发酵单位
【中图分类号】R944 【文献标识码】B
阿卡波糖是治疗Ⅱ型糖尿病的一线药物L1]。是从游放线菌(Acfi—
noplanes sp.SE50)的发酵液中提取而来,控制病人在进食含有淀粉的食
物后的血糖含量。对肠道内的一些消化酶都有强烈的抑制作用,有良好
的药动学性质和低毒性。
1 实验材料
1.1 菌种阿卡波糖产生菌:游动放线菌Actioplanessp.AC一17
1.2 培养基:种子培养基(s/100m1):麦芽糖1.8、酵母粉0.5、热榨黄
豆饼粉2.5、甘油0.2、轻质碳酸钙0.2,常水配置,调pH6.5发酵培养基(g/
100m/):高麦芽糖8、葡萄糖2、热榨黄豆饼粉2、玉米浆0.2、谷氨酸0.1、磷
酸二氢钾0.15、三氯化铁0.1、氯化钙0.3、碳酸钙0。4,常水配置,调plY/.0
2 摇瓶发酵条件
28℃摇床220r/min振摇培养28h后,3O℃摇床220r/min振摇培
养84h。
3 阿卡波糖发酵单位的测定
3.1 检测条件:岛津LC一10AT泵,SPD一10A紫外一可见光检测
器,C—R6A积分仪;正向色谱柱HypersilNH2(250mm X4.6mm,5um);流
动相:乙腈一磷酸盐缓冲液(0.叭m0l/L,pH值7.0)(65:35);流速1.0
ml/mln:检测波长210nm。
3.2 方法:将发酵液4000r/min离心30mln,取上清液1.0ml与0.5
Il1l蒸馏水和2.0ml乙腈混合后,11000r/rain离心lOmin,取上清液以微
孔滤膜过滤,取滤液20ul进样。精密称阿卡波糖标准品以二次蒸馏水配
制成200mg/L标准品溶液作对照。
3.3 效价的计算:A=(w 标×S样/s标)X样品稀释倍数,其中
A:样品中阿卡波糖的效价(ug/lIl1)W标:标准品的效价(ug/m1)S标:标
准品的峰面积S样:样品峰面积 J。
4 结果与讨论
4.1 复合有机氮源对发酵的影响:见表1。考察发酵培养基中的有
机氮源的组成。选取下列有机氮源物质组成不同的发酵培养基,看其对
发酵产量的影响。
表1 复合有机氮源对发酵的影响
培养基编号 氮源种类 效价(ug/m1)84h
【文章编号】1006—1959(2009)12—0247—01
得出7号发酵培养基,阿卡波糖发酵单位明显高于其它种类的复合
有机氮源。
4.2 速效碳源、速效氮源、磷酸盐对阿卡波糖生物合成的影响:分
别改变葡萄糖、硫酸铵、磷酸盐的用量,来考察其对发酵培养基的影响,
看其是否起抑制作用,确定其抑制最适作用浓度。
4.2.1 葡萄糖抑制浓度的考察:见表2。
表2 葡萄糖抑制浓度的考察  

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