L-异亮氨酸发酵的研究
2007-03-05 10:14:00 来源:本站原创 评论:0 点击:
L-异亮氨酸发酵的研究
何 家 骏 1 材料及设备斜面培养基、摇瓶种子培养基(略)。 1.1 一级种子培养基(%) 葡萄糖6.5,碳酸钙5.0,玉米油0.4,硫酸铵2.5,硫酸亚铁0.004g/100ml,硫酸锰0.004g/100ml,磷酸二氢钾0.35,灭菌后pH值为6.5~6.8。 1.2 二级发酵培养基(%) 葡萄糖15,硫酸铵5.0,碳酸钙5.0,硫酸锰0.008g/100ml,硫酸亚铁0.004g/100ml,硫胺素240μg/100ml,生物素30μg/10ml灭菌后pH值6.0至6.5。 1.3 设备 摇瓶机2台,一级种子罐600L2台,补糖罐2000吨2台,油罐150L1台,发酵罐2000L2台,氨水计量罐200L1台。721分光光度计1台,旋光计1台,分析天平1台,25型酸度计2台。 2 种子罐代谢考察 在无菌室内,取少许菌种接入摇瓶中,放在摇瓶机上,培养20~24h,并瓶,接入种子罐。步骤如下: 2.1 罐温 33~35℃。 2.2 通气 通入40~50℃无菌空气,流量用进气阀门调节,开始稍为小开,8h后全开。又可以用进气与排气阀门调节,(因没装流量计)。 2.3 培养周期 种子罐培养周期20~24h。 2.3.1 种子罐内菌体代谢变化 (1)pH值 培养24h后,pH稍有下降,然后再稍有回升。 (2)糖代谢 培养过程中,糖逐渐消耗,24h稍有回升。 (3)氨基氮 培养24h后,氨基氮稍有回升。 2.3.2 菌体外观变化 摇瓶培养液接入种子罐后进行培养,开始种子液为乳白色,培养20h,转乳黄色,24h后逐渐转为浅黄色。即可移入发酵罐。 3 发酵的代谢变化 利用压差法,将种子液无菌移入发酵罐,发酵按下列条件掌握。 3.1 罐温 32~33℃。 3.2 通气 通入40~50℃无菌空气,用进、排气阀门根据菌种生长情况,随时调节。 3.3 发酵周期 44~48h。 3.4 补糖 培养12h后,开始第1次补糖,全发酵过程补7~8次糖,每次补入100L。 3.5 pH值 发酵过程中,用氨水调解,12h,开始通入氨水,每8h通入15~25L,培养30h后,氨水用量下降,36h后,停止通入氨水,L-异亮氨酸发酵代谢曲线如附图: |
附图 L-异亮氨酸发酵代谢曲线 4 小 结 (原载《现代应用药学》1994年第4期) |
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