如何结合液氮使用Bullet Blender破碎组织细胞
2010-06-27 17:32:18   来源：不详   评论：0 点击：

      对于一些特别坚硬或韧性比较强的样品，如：硬骨骼、软骨、指甲、鱼鳞、结缔组织、种子等，使用普通机械研磨方法很难即保证研磨破碎效果又保证样品一直处于低温状态。传统手工研磨方法虽然能二者兼顾，但是当样品数量比较多时，手动研磨非常费时费力，而且经常存在交叉污染的可能。如果提取RNA、酶等对温度比较敏感的物质，使用液氮进行预处理，保证样品在破碎过程中一直处于低温是非常重要的。

        使用Bullet Blender进行组织细胞的破碎时，将样品用液氮进行预冷冻，这样既能保证样品的破碎效率又能保证样品一直处于低温状态。以骨骼和植物叶片为例，具体操作方法如下：

        骨骼：

        取0.3克骨骼，用滤纸吸取骨骼表面水分，放入样品管，加入1.6mm不锈钢研磨珠5粒，再加3勺0.5mm不锈钢研磨珠，盖上管盖。将整个试管放入液氮中冷冻10到20秒钟，然后放入机器处理20秒钟。取出样品管可见样品被破碎成乳白色粉末，然后加入提取缓冲液，再处理1分钟或直接进行后续提取，加入缓冲液之前能保证样品温度一直为-20℃以下。

        叶片：

        取0.2克植物叶片，清洁叶片表面后放入样品管，加入2.0mm氧化锆研磨珠5粒，再加3勺1.0mm氧化锆研磨珠，盖上管盖。将整个试管放入液氮中冷冻10到20秒钟，然后放入机器处理20秒钟。取出样品管可见叶片被破碎成绿色粉末，然后加入提取缓冲液，再处理1分钟或直接进行后续提取，加入缓冲液之前能保证样品温度一直为-20℃以下。

注意：样品管必需使用Eppendorf 1.5mL Safe-Lock微量离心管（订货号：0030 120.086）。

产品详细介绍见：http://www.bio-xplorer.com/_d269808107.htm

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