冻融对发酵用大肠杆菌甘油保存的影响
2007-07-05 23:04:01 来源:中国生化药物杂志 评论:0 点击:
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The Influence of Freezeing and Melting on the Storage of E.coli Strain in Glycerin Solution Shi Yanli Xu Dong Ding Jie(Shandong Jintai Biological Engineering Co. Jinan 250100) 微生物菌种的保存方法因微生物种类不同而有所不同,国内外对此有较多的报道[1~3]。甘油保存法是生产中常用的方法之一。在甘油保存菌种过程中,细胞内外形成的冰晶会对细胞造成结构上的损伤,从而影响菌种的存活率。本文主要探讨了反复冻融对发酵用大肠杆菌甘油保存的影响。为制药和微生物工作者提供具有参考价值的数据。 1 材 料 大肠杆菌PJLA605-HIL2。 2 方法和结果 2.1 大肠杆菌培养 表1 冻融处理后菌体存活率(%) |
组别 | 冷冻 次数 |
冷冻处理前 活菌数(个/ml) |
冷冻处理后 | 保存1年 | 保存2年 | |||
活菌数 (个/ml) |
存活率 (%) |
活菌数 (个/ml) |
存活率 (%) |
活菌数 (个/ml) |
存活率 (%) | |||
第1组 | 1 | 2.1×108 | 1.2×108 | 57.14 | 2.9×107 | 13.81 | 4.5×106 | 2.14 |
第2组 | 2 | 2.3×108 | 3.1×107 | 13.48 | 3.4×106 | 1.48 | 3.6×105 | 0.16 |
第3组 | 3 | 2.2×108 | 7.8×106 | 3.54 | 1.2×106 | 0.54 | 1.2×105 | 0.05 |
3 讨 论
在冷冻保存菌种时加入甘油作保护剂,虽然可以提高菌种的存活率,但冻融还是会造成菌体结构上的损伤。菌种每冻融一次,其存活率都会明显下降,经处理后的菌种保存1年或2年后,冻融次数越多,其存活率越低。因此,为使菌种有较高的存活率,不宜反复冻融。生产用甘油菌种一般保存1年,对1年后的菌种就要对其筛选活化后再用。 作者单位:石艳丽(山东金泰生物工程公司 济南,250100) 参考文献 1,王亚珍.乳酸杆菌的保藏方法.生物技术,1998,8(1)∶41~42
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